Διάλυμα χρώσης Hoechst 33258 (έτοιμο προς χρήση)

Ο μοριακός τύπος του Hoechst 33258 είναι C25H24N6O·3HCl, το μοριακό βάρος είναι 533,88 και ο αριθμός CAS είναι 23491-45-4. Το Hoechst 33258 είναι μια μπλε φθορίζουσα χρωστική που μπορεί να διεισδύσει στην κυτταρική μεμβράνη και ο φθορισμός της ενισχύεται σημαντικά όταν συνδυάζεται με δίκλωνο DNA. Το μέγιστο μήκος κύματος διέγερσης είναι 346 nm και το μέγιστο μήκος κύματος εκπομπής είναι 460 nm. Το Hoechst 33258 χρησιμοποιείται συνήθως για ανίχνευση απόπτωσης, πυρηνική χρώση ή συνήθη χρώση DNA. Μπορεί να χρησιμοποιηθεί για τη χρώση των πυρήνων σταθερών κυττάρων και ιστών ή μη σταθερών κυττάρων και ιστών. Μετά τη χρώση, μπορεί να παρατηρηθεί με μικροσκόπιο φθορισμού ή να ανιχνευθεί με κυτταρομετρία ροής. Όταν παρατηρείται με μικροσκόπιο φθορισμού, διεγείρεται από το υπεριώδες φως, το οποίο είναι μπλε φθορισμός.

Αυτό το προϊόν είναι μια έτοιμη προς χρήση λύση, η συγκέντρωση της οποίας είναι βελτιστοποιημένη για να καλύψει τις ανάγκες όλων των ειδών τακτικής χρώσης.

Μεταφορά υγρού πάγου. Αποθηκεύστε σε 2-8 βαθμούς μακριά από το φως, με ισχύ για 6 μήνες.

1. Για σταθερές τομές κυττάρων ή ιστών:

ένα. Για τα σταθερά δείγματα κυττάρων ή ιστών, αφαιρέστε το διάλυμα στερέωσης μετά τη στερέωση και πλύνετε με PBS ή άλλο κατάλληλο ρυθμιστικό διάλυμα 2-3 φορές, 3-5 λεπτά κάθε φορά (για την ανίχνευση αιωρούμενων κυττάρων, ακολουθήστε τη ρουτίνα μέθοδος λειτουργίας των αιωρούμενων κυψελών και η φυγοκέντρηση και άλλα στάδια προστίθενται σε όλα τα πειράματα·

σι. (Προαιρετικό βήμα) Εάν τα σταθεροποιημένα κύτταρα ή ιστοί πρέπει να υποβληθούν σε επεξεργασία με χρώση ανοσοφθορισμού, θα πρέπει πρώτα να πραγματοποιηθεί η σχετική θεραπεία και μετά να γίνει χρώση Hoechst 33258 μετά τη θεραπεία.

ντο. Πάρτε απευθείας μια κατάλληλη ποσότητα του διαλύματος βαφής του προϊόντος Hoechst 33258 (τύπου έτοιμου χρήσιμου) για να καλύψετε το δείγμα και επωάστε σε θερμοκρασία δωματίου για περίπου 5 λεπτά στο σκοτάδι.

ρε. Αφαιρέστε το διάλυμα βαφής και πλύνετε με PBS ή άλλο κατάλληλο ρυθμιστικό διάλυμα 2-3 φορές, 3-5 λεπτά κάθε φορά.

μι. Μετά από σφράγιση των πλακών ή απευθείας τοποθέτηση κάτω από μικροσκόπιο φθορισμού, το μήκος κύματος διέγερσης ήταν 350 nm και το μήκος κύματος εκπομπής ήταν 460 nm.

2. Για ζωντανά κύτταρα ή καλλιεργημένους ιστούς:

ένα. Προσθέστε κατάλληλη ποσότητα διαλύματος χρωστικής Hoechst 33258 (τύπου έτοιμου προς χρήση) στην κυτταρική καλλιέργεια για να καλύψει πλήρως το δείγμα που πρόκειται να χρωματιστεί. γενικά, 1 mL διαλύματος χρώσης θα πρέπει να προστεθεί σε ένα φρεάτιο μιας 6-πλάκας φρεατίου και 100 μL διαλύματος χρώσης θα πρέπει να προστεθούν σε ένα φρεάτιο μιας πλάκας φρεατίου 96-. Τα δείγματα επωάστηκαν για 10-20 λεπτά σε επωαστήρα στους 37 βαθμούς.

σι. Αφαιρέστε το διάλυμα βαφής και πλύνετε με PBS ή άλλο κατάλληλο ρυθμιστικό διάλυμα 2-3 φορές, 3-5 λεπτά κάθε φορά.

ντο. Παρατηρήθηκε άμεσα κάτω από ένα μικροσκόπιο φθορισμού, το μήκος κύματος διέγερσης ήταν 350 nm και το μήκος κύματος εκπομπής ήταν 460 nm.

Σημείωμα:

1. Όλες οι φθορίζουσες βαφές έχουν το πρόβλημα της σβέσης του φθορισμού. Συνιστάται η λήψη φωτογραφιών το συντομότερο δυνατό μετά τη βαφή. Για την επιβράδυνση της απόσβεσης φθορισμού, μπορεί να χρησιμοποιηθεί ένα στεγανοποιητικό σβήσιμο κατά του φθορισμού (συνιστάται το G1401).

2. Φοράτε εργαστηριακό παλτό και γάντια μιας χρήσης κατά τη λειτουργία.

Μόνο για ερευνητική χρήση!

Δημοφιλείς Ετικέτες: διάλυμα χρώσης hoechst 33258 (έτοιμο προς χρήση), Κίνα hoechst 33258 διάλυμα χρώσης (έτοιμο προς χρήση) κατασκευαστές, προμηθευτές, εργοστάσιο