Διυδροαιθίδιο

Το διυδροαιθίδιο (DHE), είναι ένας ευρέως χρησιμοποιούμενος ανιχνευτής ανίχνευσης φθορισμού για ανιόντα υπεροξειδίου. Το DHE εισέρχεται ελεύθερα στο κύτταρο και αφυδρογονώνεται παρουσία ενδοκυτταρικών ανιόντων υπεροξειδίου για την παραγωγή βρωμιούχου αιθιδίου. Το βρωμιούχο αιθίδιο συνδέεται με τα ενδοκυτταρικά νουκλεϊκά οξέα και παράγει κόκκινο φθορισμό. Όταν το ενδοκυτταρικό επίπεδο ανιόντων υπεροξειδίου είναι υψηλό, όσο περισσότερο παράγεται βρωμιούχο αιθίδιο, τόσο μεγαλύτερη είναι η ένταση φθορισμού και αντίστροφα τόσο πιο αδύναμη είναι η ένταση φθορισμού. Ως εκ τούτου, μπορεί να χρησιμοποιηθεί για την ανίχνευση του επιπέδου του ενδοκυτταρικού ανιόντος υπεροξειδίου.

Αποστολή με ξηρό πάγο. Αποθηκεύστε σε -20 βαθμούς μακριά από το φως για 6 μήνες.

Σημείωση: Οι παραπάνω μετρήσεις αντιδράσεων προσδιορίστηκαν για 6-σύστημα πλακών φρεατίων.

1. Αυτό το προϊόν είναι μια κύρια παρτίδα διυδροαιθιδίου (υπεροξείδιο ανιόντος φθορισμού ανιχνευτή) 5 mM, η οποία αραιώνεται σε διάλυμα εργασίας DHE (συνήθως 1-10 μΜ είναι αρκετό για το πείραμα) χρησιμοποιώντας κατάλληλο μέσο ή ρυθμιστικό διάλυμα.

2. Πλύνετε τα κανονικά ή τα επεξεργασμένα κύτταρα 1-2 φορές με PBS ή άλλα ρυθμιστικά διαλύματα.

3. Αφού αφαιρέσετε το ρυθμιστικό διάλυμα πλύσης, προσθέστε 1 mL διαλύματος εργασίας DHE και επωάστε για 30 λεπτά σε επωαστήρα κυτταροκαλλιέργειας προστατευμένο από το φως.

4. Αφαιρέστε το διάλυμα εργασίας DHE και πλύνετε 1-2 φορές με PBS ή άλλα ρυθμιστικά διαλύματα.

5. Δοκιμή κάτω από το αντίστοιχο όργανο. Το ίδιο το DHE είναι μπλε φθορισμού, το Ex είναι 355 nm, το Em είναι 420 nm. Όταν το DHE αφυδρογονώνεται και συνδέεται με το νουκλεϊκό οξύ, εμφανίζει κόκκινο φθορισμό, το Ex είναι 520 nm, το Em είναι 605 nm.

1. Λόγω των διαφορετικών τύπων και ιδιοτήτων των κυττάρων, η συγκέντρωση εργασίας του ανιχνευτή και ο χρόνος επώασης μπορούν να ρυθμιστούν κατάλληλα σύμφωνα με τις ανάγκες του πειράματος.

2. Το διάλυμα εργασίας του ανιχνευτή, το ρυθμιστικό διάλυμα πλύσης κ.λπ. πρέπει να προθερμανθούν και να υποβληθούν σε επεξεργασία εκ των προτέρων για να αποφευχθεί η διέγερση της διαφοράς θερμοκρασίας που επηρεάζει τα κύτταρα.

3. Οι φθορίζουσες βαφές υπόκεινται σε σβέση και η διαδικασία πρέπει να προστατεύεται από το φως.

4. Το διυδροαιθίδιο οξειδώνεται εύκολα στον αέρα, αποφύγετε την έκθεση στον αέρα όσο το δυνατόν περισσότερο, συνιστάται η αποθήκευση σε μικρές μερίδες και αποφυγή επαναλαμβανόμενης κατάψυξης και απόψυξης.

5. Για την υγεία και την ασφάλειά σας, να φοράτε εργαστηριακό παλτό και γάντια κατά τη λειτουργία.

Μόνο για ερευνητική χρήση!

Δημοφιλείς Ετικέτες: διυδροαιθίδιο, Κίνα κατασκευαστές διυδροαιθιδίου, προμηθευτές, εργοστάσιο